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产品列表如下:
产品货号 产品名称 品牌
01-010 a-GalNAc-PAA-biotin GlycoTech代理 Glycotech中国代理
01-059 Neuca2-6GalNAca-PAA-biotin GlycoTech代理
01-032 Blood type A (tri)-PAA-biotin glycotech代理
01-033 Blood type B (tri)-PAA-biotin glycotech代理
01-035 Lea-PAA-biotin glycotech代理
01-042 Leb-PAA-biotin glycotech代理
01-060 H(type 3)-PAA-biotin glycotech代理
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产品名称 产品编号 单位 大小 品牌
HOCH 2(HOCH)4 CH 2 NH-PAA-氟。 03-000 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart单糖
一个 β-D-葡萄糖- PAA-氟。 03-001 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart b -D-葡萄糖-PAA-氟。 03-002 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart一个 -D -半乳糖- PAA-氟。 03-003 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart b -D-半乳糖-PAA-氟 03-004 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart 一个 -D-甘露糖PAA-氟。 03-005 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart 一个 -D-曼-6-磷酸-PAA-氟。 03-006 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart 一个 -L岩藻糖PAA-氟。 03-007 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart一个 -L-鼠李糖,PAA-氟。 03-008 0.4毫克 1个Glycotech
Add to Shopping Cartb -GlcNAc-PAA-氟。 03-009 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart一个 -GalNAc-PAA-氟。 03-010 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart b -GalNAc-PAA-氟。 03-011 0.4毫克Glycotech
Add to Shopping Cart一个 -Neuc-PAA-氟。 03-012 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart一个 -Neuc-OCH 2 C ^ 6 ħ 4 -p-NHCOOCH 2 -PAA-氟。 03-013 0.4毫克 Glycotech
Add to Shopping Cart MDP-PAA-氟。 03-014 0.4毫克 Glycotech
平行板流动室中的动态流动分析
F低测定允许明确定义的壁剪切应力下的细胞粘附的可视化。细胞粘附不同事件的可视化可以通过选择性图像采集和后续图像处理来量化。流量测定法非常适合研究粘附事件,该事件发生的时间比大多数静态粘附测定的时间要短。此外,可以研究初始事件之后的事件,例如细胞稳定和扩散,从而可以洞悉特定细胞与细胞或细胞与基底之间的粘附行为。
材料:
显微镜检查: 倒置显微镜配置用于相衬和荧光操作 物镜(6.3 x,10 x,40 x) 阶段培养箱 | 生物: 细胞悬浮液(中性粒细胞,癌细胞) 在35毫米培养皿中使用细胞单层或涂层基底 粘附介质(不含血清的培养基,含12 mM Hepes) 纤连蛋白(人血浆) 牛血清白蛋白(BSA) |
流动室系统: 带有垫圈和管件的流动室盖板 35毫米组织培养皿 哈佛注射泵 玻璃注射器可安装在泵上(3、5、20或60 cc) 硅橡胶管 旋塞 真空泵 | 电脑/电子产品: 数字图像采集与处理系统 显示监视器 录像机 带控制器的CCD相机 时间日期生成器 带有图像系统接口的计算机 图像存储装置 |
协议:
细胞单层制备
1.在每个培养皿中加入1 ml 5.5µg / ml FN溶液,在培养皿上涂人纤连蛋白(FN)。
2.孵育30分钟。在室温下。
3.从每个培养皿中吸出溶液。
4. 根据达到汇合所需的时间,以0.5-3.0 x 10 5个细胞/ ml的接种密度,向每个培养皿中加入2 ml细胞悬液(Huvecs,CHO细胞)。
5. 1-5天后,在流量测定中使用具有融合单层的培养皿。每2-3天喂一次细胞,但通常不要48小时。流量分析。
涂层基材的制备
1.用记号笔在每个培养皿的中心划出一个涂层区域(直径5毫米),以涂覆基材。
2.将20µl含底物的溶液以10µg / ml的浓度添加到涂层区域。孵育1小时。
3.吸出液体,加20ul 1%BSA封闭1小时。
4.吸出BSA,加入20µl抑制剂1小时。
5.皿已准备就绪,可用于流动分析。
使用平行板流动室进行流动分析
1.打开阶段培养箱,将粘附介质温热37°C 1小时。在开始流量分析之前。
2.组装将入口,出口和真空管线连接到流动室平台的流动系统设备。用介质填充系统,并排出系统中的所有空气。
3.用细胞悬液填充进样池。对于使用细胞单层的测定,建议使用10 6个 细胞/ ml。对于包被的底物测定,请使用10 5细胞/ ml。
4.保持平台倒置,将滤杯连接到流动室平台上,在流路区域上放置一小片介质,然后将35 mm滤杯放置在平台上。真空将碟子固定在甲板上。确保已连接培养皿,并且流路中没有气泡。
5.将组装好的腔室放在显微镜载物台上。
6.以在0.1-4.0达因/ cm 2的范围内的剪切应力开始连接到出口流动室的细胞注射泵的流动。
7.让细胞流动足够的时间,以使足够数量的细胞与细胞单层或涂层表面相互作用。一般3-10分钟。用来。
8.开始图像获取。在培养皿上的7-10个位置收集图像。通常,在给定的实验条件下有3道菜能提供足够的数据,以显示处理之间的统计差异。
9.在所有培养皿上采集图像后,进行图像分析以定量流动分析。
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