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DNA的性质
核酸是包含生物分子的信息,它由几个基本组成部分组成:糖(RNA时为核糖; DNA时为脱氧核糖),磷酸盐和腺嘌呤,鸟嘌呤,胞嘧啶和胸腺嘧啶的四个碱基(RNA胸腺嘧啶被Uracil取代)。糖和磷酸盐形成了连接A,C,G,T或U碱基的骨架。碱基序列是生物生物学信息的基本代码。因此,为了翻译成蛋白质的氨基酸序列,将碱基一起分成称为密码子的三联体(共有64(43)个可能的三联体或密码子)。该遗传密码对于所有已知的生物都是通用的。它的特性和趋势是当今生物技术行业的驱动力。
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核酸的di一个*特征是其携带信息的能力。第二个特征是形成特定的反平行异质双链体。这基于腺嘌呤可以与胸腺嘧啶(或RNA中的尿嘧啶)形成对,而鸟嘌呤可以与胞嘧啶形成对的可能性。碱基配对能力是相同复制,信息交换和信息运输以及通过用互补核酸探测特定序列进行鉴定的原因。
合成DNA及其一些应用
一些传统上重要的应用是用于杂交的探针(用于确认特定靶序列的存在),用于DNA测序和/或PCR的引物,用于分子结构研究的DNA或RNA以及用于定点诱变的DNA片段。
在自动合成仪上构建寡核苷酸的化学过程中,有几个关键要素。
先,起始单体必须包含一个不同的偶联位点。其他可能的结合位点必须通过保护基团有效地封闭。起始单体通常为固体载体如琥珀酰CPG的形式。
必须添加要偶联的di一单体。像起始单体一样,它必须被除偶联位点以外的保护基团有效地封闭。当然,下一个单体将要连接的位点也必须受到保护,并在磷位点(如亚磷酰胺)上具有化学活性。
必须在适当的条件下允许偶联,并且必须隔离新合成的二聚体,并且必须除去其他所有物质。
二聚体与下一个单体的偶联位点必须脱保护而不影响任何其他保护基。
再次必须分离现在脱保护的二聚体,然后必须添加下一个单体,依此类推。
一旦完成适当长度的合成,就必须从产物上切下所有保护基,并从支持物上切下产物,以产生具有生物活性的DNA。
在自动综合中,这些提到的步骤分解如下:
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